Claire Redfield Três meses após o desastre em Raccoon City, Claire Redfield invade um prédio da Umbrella na França, onde é capturada e levada para a Ilha Rockfort. Lá, ela se vê mais uma vez envolta em um pesadelo e não medirá esforços até encontrar seu irmão, Chris Redfield.
Chris RedfieldRespondendo ao chamado de sua irmã, Chris vai até a Ilha Rockfort para salvá-la. Chris é um ex-integrante dos S.T.A.R.S., cujo único objetivo é dar um fim às atividades ilegais da Umbrella. Mal sabe ele que um antigo inimigo o aguarda na Ilha Rockfort.
Steve BurnsideUm dos prisioneiros da Ilha Rockfort, Steve tem somente 17 anos e teve sua família destruída pela Umbrella Corporation. Assim como Claire, ele escapou em meio ao caos instaurado após o ataque e une forças com a jovem para sobreviver àquele pesadelo.
Alfred AshfordDescendente direto de um dos criadores da Umbrella, Alfred tem sérios problemas psicológicos, causados principalmente por um amor extremo à sua irmã, Alexia. Acredita que Claire foi a responsável pelo ataque à base, responsabilidade sua desde a morte de seu pai, Alexander.
Alexia AshfordA irmã de Alfred possui uma inteligência fora do normal. Promovida a pesquisadora com somente 16 anos, é a líder do projeto de desenvolvimento do T-Veronica, um novo vírus baseado em formigas vermelhas. Sua devoção ao projeto, entretanto, atingiu níveis extremos.
Rodrigo Juan Raval Responsável pela prisão de Claire Redfield, é o chefe de segurança da Ilha Rockfort. Após o ataque e vazamento do vírus, liberta a garota e, ferido, decide ficar para trás e aguardar a morte.
Albert WeskerO traidor dos S.T.A.R.S., que todos acreditavam estar morto, vai até a Ilha Rockfort em busca do vírus T-Veronica. Wesker também está por trás do ataque à ilha e conseqüente liberação do vírus. Inescrupuloso e frio, possui agora um poder que ultrapassa as capacidades de qualquer ser humano normal...